4讨论

本文前期按照一定梯度浓度探索麝香通心滴丸最佳给药剂量，基于究麝分别以0.8、血清学探香通心滴心病1.6、药物药理3.2、化学6.4、网络丸治12.8 g/kg的疗冠给药剂量对SD大鼠进行灌胃，并对各剂量组下的基于究麝大鼠分别于给药15、30、血清学探香通心滴心病45、药物药理60、化学75、网络丸治90、疗冠105、基于究麝120 min后进行眼眶取血并分析血样。血清学探香通心滴心病结果，药物药理大鼠在6.4、12.8 g/kg剂量下图13节点数目前30的靶点各时间段含药血清的离子流图更丰富，并且基本一致，但12.8 g/kg较为浓稠，给灌胃带来不便。最终，以6.4 g/kg为大鼠给药剂量。

本研究参考文献，分别采用甲醇和乙腈沉淀血清中的蛋白，发现甲醇沉淀处理得到的血中移行成分数目较多，内源性杂志干扰较少，因此提取溶剂选用甲醇。前期考察了15、30、45、60、75、90、105、120 min共8个采血点，对血清样本质谱数据进行分析，发现不同的入血成分会出现在不同采血时间点样本中，然而在60 min后其入血成分的提取离子流响应较低，因此选择混合前4个取血点的血样进行分析。

大多数中药口服给药后，移行入血的成分才可能发挥药效，通过分析口服给药后血清中的入血成分来确定中药于体内直接作用物质，已成为确定中药药效物质基础的有效途径。本文基于HPLC-Q-TOF/MS对麝香通心滴丸进行血清药物化学研究，通过与对照品比对鉴定出8个成分，文献报道，沙蟾毒精、远华蟾毒精、脂蟾毒配基、蟾毒灵等均具有一定强心的作用。

Pharm Mapper是预测化合物生物活性，并建立相应的公共网络服务器。本研究通过该服务器，采用反向药效团匹配方法得到虚拟筛选结果，并与GeneCards数据库中治疗冠心病相关的靶点相结合，得到134个作用靶点，通过David数据库对其进行KEGG通路分析，发现这8种入血成分有较多基因靶点有富集在与冠心病相关的通路上。通过Autodock Vina对上述入血成分与核心靶基因进行分子对接，结果显示入血成分与核心靶点结合性较好。

冠心病是冠状动脉发生动脉粥样硬化，导致血管腔狭窄甚至阻塞，造成心肌缺血、缺氧而导致的心脏病。细胞凋亡是冠心病病理过程的重要因素，抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax共同参与，ErbB signaling pathway通路与细胞凋亡密切相关，其中Bcl-2家族在内源性凋亡过程中起重要调控作用。研究表明心肌细胞心肌缺血损伤后可通过活化ErbB signaling pathway通路，诱导内源性Nrg-1下调促凋亡分子Bax表达，减轻细胞由于缺氧复氧而造成氧化应激的损伤。Lin等通过Na2 S2O4诱导H9c2细胞氧化应激后，在细胞培养液中加入一定浓度的麝香通心滴丸后，结果表明麝香通心滴丸显着提高了Na2 S2O4处理诱导的H9c2心肌细胞的活力并抑制了其异常形态学变化麝香通心滴丸预处理可减轻Na2 S2O4引起的缺氧损伤，下调H9c2细胞凋亡前Bax的表达，并上调抗凋亡Bcl-2的表达。

麝香通心滴丸具有调节过PPAＲ信号通路的潜在作用。PPAＲ信号通路对冠心病的发展和糖代谢起着重要的调节作用。PPAＲ主要有PPAＲα、PPAＲβ和PPAＲγ三种表型。研究表明，PPAＲα和PPAＲγ的激活能通过抑制血管内皮炎症反应，抑制细胞增殖和迁移，抑制单核细胞转化成泡沫细胞，减少血管细胞黏附分子-1、ICAM1表达等多个方面，发挥治疗冠心病的作用。PPAＲ-γ对糖代谢的调节主要是增加外周组织对胰岛素的敏感性，从而改善胰岛素抵抗。本研究发现PPAＲ信号通路上有麝香通心滴丸与冠心病的共同靶点PPAＲA、APOA2、PPAＲD、ＲXＲB、ＲXＲA、PPAＲG、FABP3、MMP1、FABP5、NＲ1H3，因此，推测麝香通心滴丸可能通过调节PPAＲ信号通路，改善胰岛素抵抗来治疗冠心病。

血管内皮生长因子(VEGF)是调节生理或病理的血管新生及增加血管通透性的一个重要细胞因子，它与内皮细胞上的受体结合后会提高微血管的通透性，导致大量的炎性细胞渗入肺间质并产生胶原酶降解内皮下基底膜及细胞外基质，进而促进内皮细胞增生迁移，从而形成新生血管。VEGFＲ2是VEGF的主要功能受体，其与VEGF相结合主要介导血管的生成，VEGF/VEGFＲ2信号通路是VEGF信号通路中的主要信号通路，可促进血管内皮细胞的增殖、迁移、分化，同时抑制其调亡。VEGF是血管生成过程中具有关键性的生长因子，可以增加血管密度，促进缺氧区甚至无血管区域内皮细胞增殖，诱导缺血组织内的血管新生，是目前临床上已知的最强的内皮细胞有丝分裂原，可有效促进心肌重塑，本研究发现VEGF signalingpathway通路上有麝香通心滴丸与冠心病的共同靶点PIK3CG、CDC42、MAPK1、MAP2K1、MAPK14、PLA2G2A、ＲAF1、SＲC、PIK3Ｒ1、KDＲ、AKT2，因此推测麝香通心滴丸可能通过调节VEGF signaling pathway通路来治疗冠心病。

综上所述，本研究基于血清药物化学与网络药理学，在体内化学成分分析辨识的基础上通过关联网络构建及分析，初步阐释了麝香通心滴丸治疗冠心病作用机制，可为中药药效物质基础分析及其相关作用机制探究提供一定依据。

声明：本文所用图片、文字来源《中成药》2020年10月，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系

相关链接：麝香，沙蟾毒精，胰岛素，血管内皮生长因子